可以用 DTT代替2-mercaptoethanol吗
可以的。
DTT和2-ME(2-mercaptoethanol的简称,下同)都属于巯基试剂。
也就是说DTT和2-ME的作用是一样的:可以防止蛋白质或酶等分子中的巯基氧化成二硫键,维持体系的还原性环境。
β-巯基乙醇和DTT都是还原剂,防止蛋白质被氧化,β-巯基乙醇常用浓度为5-20MMOL/L,DTT为0.5-1MMOL/L。因为β-巯基乙醇加入缓冲液后24小时易被氧化,其后加速蛋白质的失活,而DTT氧化后形成稳定的分子内二硫健,并不危及蛋白的巯基,所以在蛋白制备中常用β-巯基乙醇,而长期储存用DTT。还有其上提到的试剂浓度均指终浓度。
至于使用浓度,DTT和2-ME的工作浓度一般为1-5mM,如果2-ME的浓度是1mM,由于DTT的氧化能力强于2-ME,DTT的浓度用0.5-1mM就可以了。
大学理工类都有什么专业
1、通信工程通信工程专业(Communication Engineering)是信息与通信工程一级学科下属的本科专业。该专业学生主要学习通信系统和通信网方面的基础理论、组成原理和设计方法,受到通信工程实践的基本训练,具备从事现代通信系统和网络的设计、开发、调测和工程应用的基本能力。2、软件工程软件工程是一门研究用工程化方法构建和维护有效的、实用的和高质量的软件的学科。它涉及程序设计语言、数据库、软件开发工具、系统平台、标准、设计模式等方面。在现代社会中,软件应用于多个方面。典型的软件有电子邮件、嵌入式系统、人机界面、办公套件、操作系统、编译器、数据库、游戏等。同时,各个行业几乎都有计算机软件的应用,如工业、农业、银行、航空、政府部门等。3、电子信息工程电子信息工程是一门应用计算机等现代化技术进行电子信息控制和信息处理的学科,主要研究信息的获取与处理,电子设备与信息系统的设计、开发、应用和集成。电子信息工程专业是集现代电子技术、信息技术、通信技术于一体的专业。本专业培养掌握现代电子技术理论、通晓电子系统设计原理与设计方法,具有较强的计算机、外语和相应工程技术应用能力,面向电子技术、自动控制和智能控制、计算机与网络技术等电子、信息、通信领域的宽口径、高素质、德智体全面发展的具有创新能力的高级工程技术人才。4、车辆工程车辆工程专业是一门普通高等学校本科专业,属机械类专业,基本修业年限为四年,授予工学学士学位。2012年,车辆工程专业正式出现于《普通高等学校本科专业目录》中。车辆工程专业培养掌握机械、电子、计算机等方面工程技术基础理论和汽车设计、制造、试验等方面专业知识与技能。了解并重视与汽车技术发展有关的人文社会知识,能在企业、科研院(所)等部门,从事与车辆工程有关的产品设计开发、生产制造、试验检测、应用研究、技术服务、经营销售和管理等方面的工作,具有较强实践能力和创新精神的高级专门人才。5、土木工程土木工程(Civil Engineering)是建造各类土地工程设施的科学技术的统称。它既指所应用的材料、设备和所进行的勘测、设计、施工、保养、维修等技术活动,也指工程建设的对象。即建造在地上或地下、陆上,直接或间接为人类生活、生产、军事、科研服务的各种工程设施,例如房屋、道路、铁路、管道、隧道、桥梁、运河、堤坝、港口、电站、飞机场、海洋平台、给水排水以及防护工程等。土木工程是指除房屋建筑以外,为新建、改建或扩建各类工程的建筑物、构筑物和相关配套设施等所进行的勘察、规划、设计、施工、安装和维护等各项技术工作及其完成的工程实体。专业老师在线权威答疑 zy.offercoming.com
DTT还原抗体的时候打开的是哪个二硫键
DTT 是二硫键的还原剂,还可以保持酶中-SH的还原态。
在PCR反应体系中加入二硫苏糖醇(DTT),可以打断二硫键,使染色体DNA结合的蛋白质从DNA上释放出来,导致更多的DNA与引物结合,提高扩增效率。
主要作用还是破坏蛋白质的稳定性。
DTT的作用是还原cys上被氧化的SH,也就是说可以把二硫桥拆开。
关于是否影响活性,因为一般的蛋白活性主要依靠三级结构,还原后的蛋白的三级结构被破坏了,所以活性也就丧失了。
DTT是还原剂主要破坏蛋白质的二硫键(分子内或分子间),一般来说它影响蛋白的构象,从而对蛋白的活性有影响,如果蛋白分子内无二硫键就不会影响结构或活性。
但是,有些蛋白(酶)只有在DTT或Cys存在时活性增加。
DTT为二硫苏糖醇,还原剂,可还原二硫键,对一些活性中心含有SH的酶有保护作用,防止活性中心SH的氧化。
同时在植物蛋白提取时加入,可防止植物体内酚类物质氧化对酶的影响。
请教上样缓冲液配方中DTT的用法
DTT是一种很强的还原剂,其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环(含二硫键)的构象稳定性。它的氧化还原电势在pH为7时为-0.33伏。
DTT的用途之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体,特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA在生物感应器中的固定)的效率;而在DNA溶液中加入DTT,反应一段时间后除去,就可以降低DNA的二聚化。
DTT也常常被用于蛋白质中二硫键的还原,可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。但DTT往往无法还原包埋于蛋白质结构内部(溶剂不可及)的二硫键,这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性(高温加热或加入变性剂,如6M盐酸胍、8M尿素或1%SDS)。反之,根据DTT存在情况下,二硫键还原速度的不同,可以判断其包埋程度的深浅。
western blot蛋白含量测定时 上样缓冲液要含dtt吗
有含DTT的,也有含巯基还原剂的,看你个人需求。
4×蛋白上样缓冲液(含巯基还原剂)适用于SDS-PAGE(SDS变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,β-巯基乙醇,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。
4×蛋白上样缓冲液(含DTT)适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS,DTT,溴酚蓝,缓冲盐溶液等。
dtt用什么溶解
dtt用水溶解:DTTCI属于IR染料,它易溶于水和一些极性溶剂,你可以将它溶解在无水甲醇、无水乙醇这些质子溶剂里,也可以有限互溶于丙鲖、二氯甲烷和DMSO等非质子溶剂里。DTT也常常被用于蛋白质中二硫键的还原,可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。但DTT往往无法还原包埋于蛋白质结构内部(溶剂不可及)的二硫键,这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性(高温加热或加入变性剂,如6M 盐酸胍、8M 尿素或1% SDS)。反之,根据DTT存在情况下,二硫键还原速度的不同,可以判断其包埋程度的深浅。dtt还原性:DTT是一种很强的还原剂,其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环(含二硫键)的构象稳定性。它的氧化还原电势在pH为7时为-0.33伏。二硫苏糖醇对一个典型的二硫键的还原是由两步连续的巯基-二硫键交换反应所组成:其中,第一步反应所形成的中间态很不稳定,因为DTT上的第二个巯基趋向于与被氧化的硫原子连接,使中间态很快被转化为DTT的环状氧化结构,从而完成对二硫键的还原。以上内容参考:百度百科-二硫苏糖醇
DTT的作用是什么,它对蛋白有哪些影响
DTT的作用是DTT可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。DTT对蛋白的影响是DTT也可以对蛋白质中二硫键进行还原。DTT是DL-Dithiothreitol的缩写,中文名为二硫苏糖醇。DTT往往无法还原包埋于蛋白质结构内部的二硫键,这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性。反之,根据DTT存在情况下,二硫键还原速度的不同,可以判断其包埋程度的深浅。扩展资料:由于容易被空气氧化,因此DTT的稳定性较差;但冷冻保存或在惰性气体中处理能够延长它的使用寿命。由于质子化的硫的亲核性较低,随着pH值的降低,DTT的有效还原性也随之降低。Trisphosphine HCl可以作为低pH值条件下DTT的替代品,而且也比DTT更为稳定。参考资料来源:百度百科—DTT
DTT的作用是什么,它对蛋白有哪些影响
DTT是一种很强的还原剂,其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环(含二硫键)的构象稳定性。它的氧化还原电势在pH为7时为-0.33伏。DTT也常常被用于蛋白质中二硫键的还原,可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。但DTT往往无法还原包埋于蛋白质结构内部(溶剂不可及)的二硫键,这类二硫键的还原常常需要先将蛋白质变性。扩展资料:硫键结合能力较强,典型的二硫键键离解能为60 kcal/mol (251 kJ/mol)。由于二硫键比C-C键和C-H键弱40%左右,在许多分子中二硫键往往是”弱键”。此外,S-S键反映了二价硫的极化特性,容易被极性试剂(包括亲电试剂和亲核试剂,特别是亲核试剂)切断 。二硫键的长度约为2.05 A,比C-C键长约0.5 A。绕S-S轴旋转的势垒较低。二硫化物对接近90°的二面角有明显的偏好。当角度接近0°或180°时,二硫化物是一种更好的氧化剂。两个R基团相同的二硫化物称为对称二硫化物的,例如二苯二硫和二甲基二硫。当两个R基团不完全相同时,该化合物被称为不对称或混合二硫化物。参考资料来源:百度百科——DTT
镍柱纯化蛋白为什么加pmsf和dtt
加PMSF是因为PMSF是一种蛋白酶抑制剂,可以有效的抑制菌体裂解后的释放出的丝氨酸蛋白酶和巯基蛋白酶的活性。防止它们降解消化目标蛋白。需注意PMSF溶解于水溶液后自身会迅速降解,大约1小时会自身降解完毕即失去作用。需要每1小时补加一些新鲜的PMSF。
加DTT是因为DTT是一种还原剂,可以打开蛋白质的二硫键,阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。避免His-tag被包裹在蛋白结构的内部导致目标蛋白不能结合镍柱。需注意DTT会还原镍柱上的镍离子,可能会造成镍离子的脱落而影响柱效。
DTT作用是什么
DTT作用如下:
1、作为巯基化DNA的还原剂和保护剂。在DNA溶液中加入DTT,可以降低DNA的二聚化。
2、用于蛋白质中二硫键的还原,可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。
DTT,中文名为二硫苏糖醇。分子量为154、25,纯度大于百分之99。常用还原剂,有抗氧化作用,进口分装。DTT和巯基乙醇相比,作用相似,但DTT的刺激性气味要小,毒性也比巯基乙醇低。而且DTT比巯基乙醇的浓度低7倍时,两者效果相近。
dtt是什么
dtt是什么介绍如下:dtt是二硫苏糖醇,是一种小分子有机还原剂,全英文是Dithiothreitol,简称为DTT,化学式为C4H10O2S2,又被称为1,4-二硫苏糖醇、二硫代苏糖醇、Cleland试剂。DTT简介DTT的还原性非常强,但是容易被空气氧化,所以稳定性比较差。其还原性很大程度上是由于其氧化状态六元环(含二硫键)的构象稳定性。它的氧化还原电势在pH为7时为-0.33伏。DTT的还原力受pH值的影响,只在pH值大于7的情况下能够发挥还原作用。这是因为只有脱去质子的硫醇盐负离子(-S–)才具有反应活性,硫醇(-SH)则没有;而巯基的pKa一般为~8.3。应用DTT的用途之一是作为巯基化DNA的还原剂和去保护剂。巯基化DNA末端硫原子在溶液中趋向于形成二聚体,特别是在存在氧气的情况下。这种二聚化大大降低了一些偶联反应实验(如DNA在生物感应器中的固定)的效率;也常常被用于蛋白质中二硫键的还原,可用于阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间二硫键。