大肠杆菌中的质粒是不是只有一种？
a、sokmrna能与hokmrna结合，说明这两种mrna的碱基序列互补而不是相同，a错误；
b、当sokmrna存在时，hok基因仍能转录，只是转录形成的hokmrna会与sokmrna结合，b错误；
c、根据题干信息“转录产生的sokmrna能与hokmrna结合”可知，当sokmrna不存在时，hokmrna才能翻译合成毒蛋白，c正确；
d、毒蛋白是由hok基因控制合成的，而hok基因位于大肠杆菌的rl质粒上，因此一个不含任何质粒的大肠杆菌不会被这种毒蛋白杀死，d错误．
故选：c．
关于酵母质粒转化大肠杆菌
大肠杆菌属于细菌，酵母菌为单细胞真菌，细菌的基本结构包括：细胞壁、细胞膜、细胞质、遗传物质；真菌的基本结构包括：细胞壁、细胞膜、细胞质、细胞核等．故真菌和细菌在细胞结构上的明显区别是有无成形的细胞核．
酿酒酵母的电转感受态制备方法和电转化方法
(1)接种工业酒精酵母至30 mL液体YEPD培养基，30度培养12 h；
(2)取培养物以1%的接种量转接到30 mL新鲜YEPD液体培养基中，30度培养8 h，
使菌体达到同步生长状态；
(3)将酵母培养物置于冰上放置30 min后，6,000 r/min离心5 min收集菌体；
(4)弃上清，加入已预冷的15 mL超纯水洗涤菌体一次；
(5)6,000 r/min离心5 min收集菌体，用15 mL 1 mol/L山梨醇重复洗涤菌体三次；
(6)离心收集菌体，加入200μL 1 mol/L山梨醇重悬浮菌体，取200μL的菌悬液至1.5 mL
离心管中；
(7)在制得的菌悬液中加入20μL(≤5μg)待转化的质粒或DNA片段，轻轻混匀后冰浴
10 min；
(8)将冰浴后的菌悬液转入已预冷的电转杯中，1,500 V电击5 ms；
(9)加入适量体积的1 mol/L山梨醇将电转后的菌悬液从电转杯中洗出，取200μL涂布
相应的抗性平板；
(10)30度培养3-5天挑选转化子。
许多大肠杆菌的质粒上含有lacz基因
31．（8分）许多大肠杆菌的质粒上含有lacZ’基因，其编码的产物B-半乳糖苷酶在X-gal和IPTG 存在下，可以产生蓝色沉淀，使菌落呈现蓝色，否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞，过程如下图。请据图回答：
(1)基因工程中，构建基因表达载体的目的是 ▲ 。
(2)限制酶EcoRI的识别序列和切点 是-G ’AATTC-，Sma I的识别序列和切点是-CCC’GGG-。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前，需在目的基因的右侧连接相应的末端，连接的末端序列是 ▲ ，连接过程中需要的基本工具是 ▲ 。
(3)转化过程中，大肠杆菌应先用 ▲ 处理，使其处于能吸收周围 DNA的状态。
(4)菌落颜色为白色的是 ▲ ，原因是 ▲ 。
(5)菌落③中的目的基因是否能表达，可采用的检测办法是 ▲ 。
【答案】
31.（8分）（除标明的外，其余每空1分）
(1)使目的基因在受体细胞中稳定存在，能遗传给后代，并表达和发挥作用（2分）
(2) -TTAA DNA连接酶
(3)Ca2+
(4)菌落③
lacZ’标记基因区插入外源基因后被破坏，不能表达出3-半乳糖苷酶，故菌落为白色 (5)抗原一抗体杂交 。
请采纳~
【高中生物】如题，这四种大肠杆菌含有的基因有什么区别？如何判断得出？
LZ您好.
4种大肠杆菌分别是:
未被转化的,也就是说质粒根本没进去.
含有环状目的基因的,限制酶将目的基因所在的环一分为二,然后2个目的基因首尾相接构成一环.这些大肠杆菌拥有目的基因,但没有Amp'
含有质粒载体,那么就是说2个质粒的粘性末端结合在了一起,这个质粒里面没有目的基因,但有Amp'
最后是正确插入目的基因的重组载体,这个菌体里有Amp'也有目的基因
其中第一种仍然占绝大多数,第二种占的百分数很少.第三种也是不要的,第四种是要的.
Amp'是氨苄青霉素抗性基因,也就是说第三种和第四种放置于氨苄青霉素环境中无碍,而前两种会死.用这个方法能大幅上升培养基上我们要的大肠杆菌数目的百分比,然后再进行下一步操作!
当质粒转化进大肠杆菌时，通过什么原理表达目的基因
当质粒转化进大肠杆菌时，通过DNA复制原理表达目的基因。
CaCl2对特定的大肠杆菌处理，制备感受态的细菌。这些细菌可使每微克超螺旋质粒DNA，如一些插入目的DNA片段的重组质粒，产生5×106~2×107 个转化的菌落。当质粒与这些大肠杆菌混合后，质粒粘附在大肠杆菌的表面，在42℃的温度时，大肠杆菌出现热休克，质粒可通过大肠杆菌细胞膜上形成的空隙进入菌体内。随后，加入LB培养液，于37℃振动培养可使细菌复苏，并且表达质粒编码的抗生素抗性基因，提高转化效率。转化成功的大肠杆菌可以在相应抗生素培养皿中传代，形成菌落。
由于大肠杆菌繁殖快，在适宜的条件下繁殖一代仅需要20~30分钟，而且常用质粒可以在大肠杆菌中达到几百个拷贝，因此，通过对转化成功的大肠杆菌培养，可以在短时内极大地扩增目的质粒。（作为分子生物学用大肠杆菌，是经过实验室改造过的工程菌。）
将大肠杆菌的质粒与目的基因结合后，将新的质粒导回大肠杆菌，进行检测时，一般检测标记基因
所谓转基因技术需要一个好的载体能转化到细胞中，该载体具有多拷贝，能自主复制；具标记基因；具多克隆位点等特点。当然质粒是一种理想的载体，但需要经过人工改造以达到预期理想用途。现在多为人工修改后的载体。
标记基因说到底是用于报告目的，确定该载体是否转化成功。例如有的载体上携带看潮霉素基因，在转化时就能用添加潮霉素的培养基来筛选未转化成功的细胞株。
多克隆位点就是用于接收外来目的基因的，该位点上有多种内切酶位点，在适合条件下载链接酶的作用下将插入的目的基因链接到载体上。然后将该改造后携带目的基因的载体转化到大肠杆菌中，初步筛选出转化成功的转基因工程菌株，可通过检测标记基因来判断。
当然需要进一步确定，还得通过目的基因PCR结果结合酶切电泳来判断。
希望这样解释能让你理解，
以大肠杆菌质粒DNA为载体克隆一个编码动物激素的基因，并使之在大肠杆中表达，通常遇到的问题是什么?
【答案】：要使动物中编码激素的基因在大肠杆菌中表达，通常遇到的问题有：
(1)必须利用原核细胞的表达调控原件。如细菌的RNA聚合酶不能识别真核生物的启动子。
(2)大多数真核基因有内含子，这些内含子在转录后从前体mRNA中被切除而形成成熟mRNA。细菌细胞没有这样的机制来去除内含子。
(3)没有翻译后的加工和修饰系统。
(4)产生的真核生物的蛋白质产物可以被细菌的蛋白酶所识别和降解。
