如何把vcd刻成DVD
你说的有可能是你十年前的婚礼光盘吧,哈哈,不好好珍惜,等光盘坏了才发现它的珍贵了!
方法:1
损坏的VCD视频光盘一般不好恢复,原因在于直接用光驱复制,在复制的损坏区后就会中断,造成文件无法复制,这种情况下只好使用损坏光盘拷贝工具,如BadCopy 等,网上搜索光盘数据恢复就会得到很多。不过这些软件的拷贝成功率也不是很高。
方法:2
使用牙膏,使用这种方法时要注意,并不是所有的牙膏都能去划痕,大多数牙膏有很大的磨损特性,反而把光盘越磨越花。所以,建议使用对牙齿磨损比较小的牙膏来擦光盘。具体方法是:把光盘光面(当然是打磨光面)朝上放在干毛巾上,目的是为了不让它滑动。然后用纯度比较高的药棉,蘸些牙膏,湿些水,对着光盘划痕处稍微用些力,以旋转方式擦拭划痕,直到划痕变浅。
方法:3
市面上有专用的光盘抛光机,但价格较贵,而且用了光盘会变薄。
方法:4
最后一招:买一张视频采集卡,将VCD光盘放入影碟机,AV输出插采集卡的AV输入,然后播放视频在电脑中进行采集,这样会连同马赛克的部分一起采集,用视频后期软件进行加工一下。最后合成输出。
对了,别忘了,将你的VCD光盘放入清水中泡一下取出,用柔软的布由中心向外擦干,也会有意想不到的效果!
怎么把电脑上的视频文件刻录到VCD上!?
用Nero
Burning
ROM
9是一款非常优秀的刻录软件,不仅操作简单,功能也非常强大,是光盘刻录用户的首选刻录软件。网址:
http://www.greenspe.com/soft/14491.html
http://www1.gobee.cn/downinfo/22995.html
刻录VCD光盘
启动Nero后,进入,然后在新建专辑窗口左侧的功能列表框中点击“VCD”按钮,然后设置参数:在VCD选项卡中将“编码分辨率”选为“PAL”;Nero也能制作2.0版的VCD,你只要在“菜单”选项中设置好各项参数即可。但对于初级用户来说,没有必要制作2.0版的VCD。因此,建议初学者不要选择菜单选项中的“允许菜单”,直接点击“新建”进入程序主界面即可。
在“刻录窗口”中,Nero已经自动创建了VCD光盘中必需的几个目录,我们现在要做的是——从“文件浏览器”中将需要刻录的视频文件拖放到界面左下角的“轨道”窗口中。
在拖放文件时,Nero会自动检测文件的合法性,对于不符合VCD标准的MPEG文件它会报警。
提示:如果你刻录的是多段MPEG文件,一定要注意文件的排列顺序,最后按照一般的刻录操作程序完成刻录工作。
什么软件可以制作VCD
亲,给您推荐两款:
1.家家乐电子相册制作系统V2007.09┊制作VCD/DVD电子相册┊简体中文绿色特别版http://www.greendown.cn/soft/773.html本系统帮助您管理您的图片、相片,有150种图片切换显示方式,并生成完整的电子相册或VCD、SVCD、DVD格式的视频文件,方便刻录到光盘。在光盘中即可直接播放。系统中,对每相册中,可以设定多达500个主题,每个主题中可以设定单独的背景音乐文件(最多可达50首),设定每个主题的封面图片。对每幅图片,可设定图片的标题,拍摄日期、显示方式、图片的延迟及其他有关说明。
2.数码相册大师V7.0┊家庭VCD/SVCD/DVD电子相册制作软件┊简体中文绿色特别版http://www.greendown.cn/soft/5322.html数码相册大师>是一款非常优秀的家庭VCD/SVCD/DVD电子相册制作软件,您只需简单三步设置一下相应的背景音乐、特效、文字等,之后在数分钟内它就可以帮您制作出绚丽多彩的VCD/SVCD/DVD电子相册了;然后用刻录软件把它刻录在光盘上,让您轻松和家人或朋友分享多彩的数码时代的乐趣!软件界面操作简单,易上手,使用方便。打造电子相册家庭VCD/SVCD/DVD制作软件的精品。【摘要】
什么软件可以制作VCD【提问】
亲,您好,我已经看到您的问题了,正在为您整理答案,请您稍等一下。【回答】
亲,给您推荐两款:
1.家家乐电子相册制作系统V2007.09┊制作VCD/DVD电子相册┊简体中文绿色特别版http://www.greendown.cn/soft/773.html本系统帮助您管理您的图片、相片,有150种图片切换显示方式,并生成完整的电子相册或VCD、SVCD、DVD格式的视频文件,方便刻录到光盘。在光盘中即可直接播放。系统中,对每相册中,可以设定多达500个主题,每个主题中可以设定单独的背景音乐文件(最多可达50首),设定每个主题的封面图片。对每幅图片,可设定图片的标题,拍摄日期、显示方式、图片的延迟及其他有关说明。
2.数码相册大师V7.0┊家庭VCD/SVCD/DVD电子相册制作软件┊简体中文绿色特别版http://www.greendown.cn/soft/5322.html数码相册大师>是一款非常优秀的家庭VCD/SVCD/DVD电子相册制作软件,您只需简单三步设置一下相应的背景音乐、特效、文字等,之后在数分钟内它就可以帮您制作出绚丽多彩的VCD/SVCD/DVD电子相册了;然后用刻录软件把它刻录在光盘上,让您轻松和家人或朋友分享多彩的数码时代的乐趣!软件界面操作简单,易上手,使用方便。打造电子相册家庭VCD/SVCD/DVD制作软件的精品。【回答】
怎么做VCD
首先你要搞清楚你的需要,因为DVD文件不是简单的MPEG文件,它是VOB文件!
目前硬盘DV的生产商为迎合用户对DVD的需求,多数机器拍摄的视频都以DVD格式记录在可以搽写的光盘上,有部分是可以选择格式的,你可以设置记录的格式为DVD或MPEG1(可以制作VCD)或MPEG2(可以制作SVCD和DVD),购买DV时最好选择格式可自己设置的,这样适合各种摄象需要.
硬盘摄象机不用1394卡,可以直接复制到硬盘,经过编辑软件剪辑和配音后,刻到光盘上,所以你必须要有DVD-RW,它可以刻DVD\SVCD\VCD,还需要视频编辑软件(绘声绘影就可以使用).才能制作真正的视频光盘!同时你的电脑配置要比较好(P4/2.4以上/512以上内存/128MB显卡),配置太低的机器做的视频光盘清晰度差^或把你的DV复制粘贴到你的电脑硬盘再从硬盘刻录DVD或者VCD光盘,首先你得刻录机.
最好是先下载刻录软件:
Nero
Burning
Rom
V7.5.9.0
简体版
.
建议你先买一张可擦写的空白光盘试试,我买了一张SONY的DVD+RW4.7GB,大多数是5元.
安装后刻录DVD,点数据,点刻录DVD光盘多次刻录前打勾,点添加查找我的电脑你要刻录CD,DVD点击之后关闭,刻录软件点下一步点刻录,刻录完点结束,刻录光盘从光驱弹出你的CD,DVD已刻录完毕.
具体可以看这里的教程
http://www.alisoho.com
如何制作在VCD或DVD上直接能播放的格式
分类: 电脑/网络 >> 软件 >> 多媒体软件
问题描述:
我在网上下的rm/rmvb格式的电影,想刻成盘在家里的VCD或DVD上播放,请问怎么做?谢谢!最好能有详细的步骤。
解析:
一、用VideoPack4.0制作 VideoPack4.0是德国CeQuadrat公司出品的VCD2.0制作软件,最早是WinOnCD的 外加模块,后来功能增强而独立出来成为单独的商品软件。 VideoPack4.0堪称目前 业余条件下专业制作VCD2.0的最佳软件。它采用与WinOnCD相同的烧录引擎,所以只 要是WinOnCD支持的CDR烧录器,VideoPack4.0一定也支持,如果VideoPack4.0还不 认得你的CDR,那么就赶快去以下地址(cequadrat/support/driver. )淘淘金吧。
制作步骤: 1.启动VideoPack4.0(图一),在上面的文件列表窗 口中找到准备好的MPG文件。
2.用鼠标把MPG文件拖到下面的VideoCD窗口中。
3.按 下烧录钮烧录,一张最简单的VCD就诞生了。
二、用EasyVCDCreator制作 EasyVCDCreator是EasyCDCreator中的一个模块。 EasyCDCreator是Adaptec公司收购Corel公司后,把CorelCDCreator的操作界面与E asyCDPro95的烧录引擎相结合的产物。EasyCDCreator可以让你先把设计好的VCD试 播看看,还有向导(Wizard)来指导你一步一步操作,颇符合“Easy”的要求,不 过它制作出的VCD播放起来并不“Easy”,Simplevideosequence(简单顺序型)VCD在 VCD机上播放还行,在电脑上用Xing播放,只能播出最后一轨,OneLeveMenuStruct ure(单层选单型)VCD播放起来就更怪了,所以要做选单型VCD只能用VideoPack4.0。
一使用向导(Wizard)制作
1.启动VideoCDCreator,有两个选择,在此选Simplevideosequence(简单顺序 型)。
2.按ADD按钮加入MPG文件(标准VCD2.0格式),VideoCDCreator对MPG文件进行 格式检验(实际上是调用Xing),如果是标准VCD2.0格式就烧在mpegav目录下,可 用VCD机播放,否则就烧在segment目录,不过这就只能在电脑上看了。
3.按向导提示选下一步,直到出现图二界面,把左边窗口中的播放项Add到右边 的窗口中。
4.继续按向导提示操作,直到烧录成VCD。
二不使用向导(Wizard)制作
1.启动VideoCDCreator,按“取消”键关闭向导(Wizard)。
2.等出现图三界面,先把MPG文件拖到左边窗口中,VideoCDCreator对MPG文件 进行格式检验,然后再把左边窗口中的播放项拖到右边的窗口中。
3.烧录成VCD。 使用EasyVCDCreator时有几件事要提醒大家:1.必须安装Xing,最好是3.30版, 因为EasyVCDCreator是利用Xing来检验MPG文件格式和试播的。 2.EasyVCDCreator临时文件存放目录不可以和EasyCDCreator的一样。而且临时 文件存放空间一定要大,要比制作的VCD容量略大。 3,烧录时要选用TAO方式,笔者用DAO方式至今没烧录成功过。 讲了一大堆的
注意事项,还有一个小秘密要告诉大家喔:那就是EasyVCDCreator能接受VCD的DAT 文件再烧录成VCD,这一项是不是很有用?该知道怎么做了吧!
三、用WinOnCD3.X制作 WinOnCD可是烧录软件中的大哥大,以支持CDR机最多、功能最强大著称,自从 VideoPack从它这里分离出去以后,WinOnCD就只剩下功能单一的VCD制作模块了,仅 能制作简单顺序型VCD,不过这对初学者来说正合适。
1.启动WinOnCD,选VCD2.0出现图四界面。看看界面是不是和VideoPack4.0很象? 毕竟他们是“同胞兄弟”。
2.在上面的文件列表窗口中选定MPG文件,然后用鼠标拖到XA02下。 3.按烧录按钮就可烧成VCD了。 EasyCDCreator和WinOnCD是最常见的CDR烧录软件,有CDR的朋友几乎都有这两 个软件,只是平时很少用他们来做VCD罢了,其实制作一些简单的VCD时只要正确地 运用这两个最常用软件,还是能达到目的的,至于要制作菜单型VCD和相册等多功能 的VCD就非VideoPack4.0莫属了
制作VCD光盘要用什么格式的视频文件
VCD采用MPEG-1的压缩方法来压缩图像,分辨率为 352*240 (NTSC制式) 或 352*288 (PAL制式),码率为1.15Mb/s;音频编码为MPEG Layer 2。制作VCD光盘所要求的视频文件格式,是按照上面要求进行视频、音频编码的MPG格式。如果用来刻录的视频素材不是这种格式,可以用格式工厂等视频转换工具,把视频转换为这个格式。然后使用 Nero Burning ROM 等工具,刻录介质选CD,类型选视频光盘。刻录成功后,VCD光盘就可以在VCD机上播放了。
摄像机摄像后 在会声会影上制作vcd的步骤?
1、将机摄像内要制作的视频拷贝(或者采集)到电脑硬盘上;
2、打开电脑中的会声会影,并把要已经拷贝在硬盘上的视频加入到会声会影素材区;
3、设置会声会影是按16:9还是按4:3比例进行视频编辑(现在多数都是16:9的液晶电视、电脑显示器了,建议按16:9进行视频编辑);
4、按你需要的顺序把已加入素材区的视频拖放到会声会影视频轨或覆叠轨上;
5、需要的话,加上转场特技、字幕、配音等
6、反复预览、调整,直到满意后,选择“分享”——“创建光盘”——“VCD”,放入刻录光盘到刻录光驱中;(现在人们都刻录蓝光DVD了,你还做VCD,还是刻录DVD把。且会声会影高版本中已经没有刻录VCD视频光盘的功能了)
7、选择刻录就行了,刻录完成光盘会弹出。
如何制作FC游戏VCD光盘?
找个刻录机,放张CD-R,建个目录,把自己喜欢的ines格式的FC ROM加进去,刻成碟,放到游戏VCD/DVD里,机器会自动进入文件选择状态,通过遥控器或手柄在屏幕上显示的目录里选择游戏,进入游戏开始玩——就这么简单。
1、所有的ROM放在1个目录内,第2个目录好像机器不认。
2、DVD/VCD机器不支持中文文件名显示,所有中文显示为“—”,因此刻录前最好把ROM文件全改成英文。
3、个别游戏好像运行不了,不知道是机器的问题还是ROM有问题。
4、一般常见的FC游戏都可以玩,包括原来VCD光盘上没有的经典节目,如脱狱、双截龙2&3、恶魔城、蝙蝠侠、赤影战士、松鼠大战1&2等等。还有部分游戏画面有点问题,有些遗憾,如超级魂斗罗、人间兵器、加纳战机等画面出错或没有背景,而忍者龙剑传123的某些版本不能进入游戏。有时间和机器的朋友可以慢慢去尝试,毕竟GOODNES里的ROM还是比较多。
5、游戏中要退回到文件选择画面可以同时按A+B+START组合键
几个月来反复研究FC游戏VCD光盘上的BIN文件结构,妄图找到制作相同游戏节目光盘的方法,今天才发现,一切都是近乎是徒劳无功。 惭愧! :(
其实,市面上流行的带有8位游戏(也就是FC/NES)功能的DVD/VCD,本身就直接支持ines格式的ROM文件。随机器附带的300游戏光盘“误导”了大家——当然包括我自己。很多有这类机器的朋友也早就知道了,只是大家缺少了点交流而已。
看到“莫失莫忘”在ISO区发的“【分享】刻录自己的SEGA16位游戏VCD”帖子后,(http://bbs1.chinaemu.org/htm_data/63/0603/46858.html)
很想把自己近日尝试制作FC游戏VCD光盘的努力和难题汇报一下,希望能得到各位的指点。
大约从2001年起,市面就出现“FC游戏VCD影碟机”了,直到现在还有很多集成了FC游戏功能的DVD+MPEG影碟机在市面销售。这种影碟机配有1张光盘,号称集合了300个FC游戏,其中大约50%是重复节目,值得玩的经典节目比较少。于是很多玩家/网友都想,能不能自己做一张这样的光盘,把喜欢的FC游戏节目合在一起,在大屏幕电视机上过过瘾,哈哈。
经过查看分析,这张FC游戏光盘是一种特制的VCD格式光盘,可以被识别成视频光盘,但在没有游戏功能的影碟机上不能被识别和播放。光盘上的目录结构和标准的VCD不一样,光盘根目录下友6个子目录,分别是:
\CDI
\EXT
\MPEGAV
\NEWROM
\SEGMENT
\VCD
其中,MPEGAV是空的里没有文件
SEGMENT目录里存放这30个游戏选单文件和一个空选单文件
NEWROM是标准VCD上没有的目录,里面存放着从G001.BIN~G300.BIN共300个ROM文件。
这300个BIN文件的文件长度远大于对应的NES ROM文件长度,经EZ论坛的SSforME 分析,这个BIN文件比相应的NES ROM多了个文件头和文件尾。认为将网上下载的NES格式的MAPPER0的ROM去掉文件头,再将以下的a.bin加到ROM之前,将b.bin加到ROM之后,即为VCD要求的BIN格式!
为了测试SSforME的分析是否正确,现在只有开始制作自己的BIN文件来替换光盘上原有的ROM文件,并刻盘了。下面以单个文件为例,介绍我制作FC游戏VCD的过程:
1、首先根据游戏光盘的节目单找到可以替换的MAPPER0的游戏,例如冒险岛(G199.BIN文件大小是98KB)这个游戏,就是MAPPER0的。
2、在网上下载的NES格式ROM文件中,选一个MAPPER0游戏,例如”田间战斗.nes”(FIELD COMMBAT,光盘上也有,在第4页第2个—G032.BIN)
3、准备好转换用的a.bin和b.bin(见附件)
4、用winhex打开[田间战斗.nes],删去文件前面的16个字节(NES信息),在文件前插入a.bin,在文件后面加上b.bin,保存为G199.BIN,文件大小为80KB。
5、用NERO或Alcohol 120%或UltraISO等软件制作FC游戏VCD光盘的镜像并保存,称为[8位FC游戏VCD光盘镜像 ]
6、用WINISO打开[8位FC游戏VCD光盘镜像],将镜像文件里的G199.BIN改名为G999.BIN,上传制作好的新G199.BIN到镜像文件的NEWROM目录,删除镜像文件里刚才改名的G999.BIN。
这里,先将原文件改名再上传新文件的操作,是因为WINISO不能直接覆盖镜像内原来的同名文件。不先删除原来的BIN文件,是怕光盘布局发生变化。
7、选保存(镜像文件),覆盖原镜像。注意这里不是[另存为],如果选[另存为。。。]那么光盘布局可能发生变化,保存的新镜像会变成“非启动光盘”,而不再是VCD视频光盘了。
8、用UltraISO打开新的[8位FC游戏VCD光盘镜像],看看光盘格式还是不是“VCD视频”,如果是的话,就可以被游戏VCD影碟机识别。
9、用NERO刻录镜像文件(映像)到CD-R。
到此,新的游戏光盘终于制作好了,按照预期,在游戏VCD影碟机上玩的时候,选第199个节目,将不再是“冒险岛”,而是“田间战斗”(FIELD COMMBAT)
不过.........
当我将刻录好的CD-R拿到游戏VCD上用,可以识别成游戏VCD,进入游戏没有问题,可是在选取第199个游戏的时候——也就是原来选单画面第20页第9项[冒险岛],问题来了!
出来的游戏竟然还是[冒险岛],不是已经替换成“田间战斗”(FIELD COMMBAT)了吗,原来的G199.BIN不是也删除了吗?怎么还是冒险岛,难道替换和删除无效?
在PC上打开这张CD-R查看,光盘上的G199.BIN文件大小确实是80KB,是替换上去的新田间战斗G199.BIN啊,原来98KB的冒险岛G199.BIN确实不在目录上了。
这是怎么回事,难道这张光盘调用游戏ROM不用目录,直接在光盘的固定扇区读取?
本文转贴自 浮游城 - Castle in the Sky ,原文地址:http://bbs.chinaemu.org/read.php?tid=59447
怎样把数码相片制成VCD光盘
分类: 电子数码
解析:
每次过节之后,大家都会拍下很多照片,你和全家人分享照片是在电脑前吗?这可就是太俗气了,不如看看下面的方法,让你们全家在电视前欣赏照片吧。
要想用电视欣赏照片当然是用VCD来播放照片,于是我们就要将这些照片转换为VCD视频。现在转换照片的方法有很多,其中比较简单的就是用NeroVision Express SE(以下简称NeroVision)。
第一步:运行NeroVision,打开软件界面,在“您想做什么?”中选择“制作幻灯片→视频光盘”(见图1),就可以打开“未命名项目”幻灯片(照片)制作窗口(见图2),我们的主要工作就在这里完成。
第二步:添加照片素材。在左上角“我的媒体文件”下拉菜单中选择“创建新组”命令,在“创建资源组”对话框中输入自定义的组名称如“CFan”。点击下方的“浏览媒体”按钮,选择“浏览”在随后的“资源管理器”中找到数码照片。现在你就可以在工作区内预览到这些照片了,但它们还没有添加到项目中,你需要选中这些照片,右击选择“添加到项目”命令,将它们添加到当前项目,此时工作区下方“影带”上就会显示这些照片。
小提示
选择“浏览媒体→浏览并添加到项目”项,可以一步到位将硬盘中的照片添加到当前项目,不过建议大家使用“浏览媒体→浏览”命令,这样对定义照片前后顺序等操作有许多帮助。
注意同一张照片是可以重复添加的。
第三步:设置照片显示。如果需要更改图片前后顺序,可以用鼠标按住原图片然后拖到需要调整的位置即可。NeroVision默认每幅照片显示时间为4秒,要想多欣赏一下照片,可在“影带”的空白处右击,选择“默认持续时间值”,在打开的对话框中,将“画面可见性时间”设为更高,如10秒,并且勾选“应用到现有画面”项,这样所有的画面都能显示10秒了。
小提示
如果需要对单独的某张照片进行显示时间的调整,则只要在影带区中右击该照片,选择“属性”,然后就可以修改显示时间了,在这个窗口中还可以为照片添加文字。
第四步:增加转场效果。简单的几张照片“硬”切换,显然不太美观,现在就让NeroVision的重头戏出场。点击右上方的“显示转场”标签,从中可以看到NeroVision为我们预设了多款精美的转场效果。先选中需要添加转场效果的照片,然后在转场效果中选择不同的效果就可完成转场的添加。
如果你觉得这样很麻烦也可以直接在“影带”的空白处右击选择“将随机转场应用到所有转场域”或“将随机转场应用于空白项转场域”(见图3),这样NeroVision就会自动为你填添各种转场效果了。
图3 最后要为VCD增加不同的超炫效果
第五步:添加声音效果。观看精彩的照片VCD,没有背景音乐怎么成?点击添加素材的“浏览→浏览并添加到项目”命令,找到电脑中准备好的MP3、WAV等音频文件,完成后在下面“影带”的“显示音频”标签中就可以看到你添加的音频文件。
小提示
所选歌曲的长度最好与窗口右下角的“总幻灯片持续时间”相当。
第六步:一切准备就绪,点击右上方预览窗口下的绿色“播放”按钮来看看效果吧,还可点击“全屏”按钮来全屏幕显示,如果满意的话就点击右下方的“下一步”按钮。
第七步:这时会打开“目录”窗口,点击“制作新幻灯片”按钮,这时可以按照前面的方法添加新的照片文件,从而实现不同的照片分成不同的视频片段,以方便在使用时快速找到指定的照片。将所有的照片添加完后,在“目录”窗口中点击“下一步”来到“选择菜单”。
第八步:设置选择菜单。选择菜单会显示到VCD的“首页”,也就是VCD 2.0中的选择菜单。面子问题不得不重视,在自定义窗口中点击任意位置,就会出现“您想要修改什么?”的提示窗格,根据你的需要进行相应的修改即可(见图4)。完成后“下一步”,在“预览”窗口利用“遥控器”再次检查我们辛苦的项目结果,再次点击“下一步”。
图4 设置VCD菜单
第九步:设置刻录选项。在“设定刻录参数”中选择好合适的刻录机,光盘名称,以及刻录速度,最后点击“刻录”按钮,在刻录机中放入空白刻录光盘,片刻后,拥有精美照片,华丽转场的照片VCD光盘就完成了。
用DVD刻录机!做VCD光盘
分类: 电脑/网络 >> 软件 >> 多媒体软件
问题描述:
我以前三星康宝机!后来为做DVD方便!换了一个先锋DVD111-XL!而做来的VCD盘!不能正常在家用VCD上播放了!显示坏盘!在家用DVD上显示VCD2.0!请问是什么原因!
用NERO7.0
解析:
呵呵 我的是 110-xl 跟你的差不多 我刻的很好
你是用nero刻的时候出了问题
czjdys/images_o/guangpankelu 看看这个吧
再看 看下面的解决办法:
近年来,随着刻录机价格的一降再降,使它愈来愈成为一种标准的电脑设备而走进我们的生活,不少电子爱好者把自己家里珍藏的家庭录像刻录成VCD光盘保存起来,但发现许多VCD机无法读取我们用CD-R刻录的VCD碟,这也是制作商业VCD的朋友们经常遇到的问题。下面笔者把遇到的上述问题并结合解决办法与同行切磋探讨,以期共同交流提高。
分析第一种原因是使用了CD-RW(可擦写)光盘,因为目前市面上绝大多数VCD机还不支持CD-RW盘,这一点大家要注意。
第二种原因是MPEGI文件的规格不同。在刻录时一定要注意所刻录的MPEGI文件(扩展名一般是DAT或MPG)一定要符合标准的VCD MPEGI PAL或相同的NTSC规格,否则将在VCD机上无法播放。如何知道是不是标准规格呢?只要用一些播放软件,比如超级解霸2000、Power DVD来检测一下就可知道。
第三种原因是刻录时取了中文名或长文件名,当然有些刻录软件(比如Nero)在刻录时能够自动对MPEGI文件重命名,可避免此现象,这一点尤其要注意,因为VCD机无法读取中文名或长文件名(一般不超过8个英文字母为宜)。
第四种原因是使用了超长CD-R盘,因为传统CD-R的容量是650MB,时间是70分钟左右,但是现在市面上有大量的700MB甚至是750MB的CD-R,时间可长达80~90分钟,如果用它来刻录VCD,就可能因为规格的关系而无法在较早期的VCD机上播放,当然现在市面上大部分VCD机一般可正常播放。
第五种原因是过量刻录,也称“超烧”,就是刻录的文件比你使用的CD-R容量多一点。有些VCD机播放时就会产生无法播放或在播放过程中停顿、死机等现象,所以最好不要使用超长刻录。
第六种原因也是VCD机遇到的最常见的原因,它与刻录方式、CD-R没什么关系,而是一些“人为”原因。比如光盘表面贴有标签,那么在读取时就可能因为转速不稳而导致激光头无法正常读取或后半部内容无法读。还有光盘表面不干净、有擦伤或划痕等都会导致VCD机无法正常读取,解决的办法大家已经知道,不再多说。
如果一张刻好的VCD光盘在大部分VCD机上能播放而在少部分机上却无法播放时,这与VCD机也有很大的关系,特别是早期的万利达、新科系列的三碟机,“挑盘”非常严重。本人曾做过试验,用一张“清华同方”VCD刻好的VCD碟(上述所有原因都已排除)在万利达三碟机上显示“无碟片”,而在其他机甚至是小贩二百多元的VCD机上却能够正常播放。但是换另一种CD-R比如“大自然”、“优百特”,以同样方法刻录,却在万利达机上能正常播放。这种问题的原因笔者也说不清,唯一的解决办法就是换另一种碟片试播一下。或者降低刻录速度,用4速甚至2速刻录,也许能够解决。值得注意的是在所有不读CD-R碟片的VCD机中,万利达机占了绝大多数,这到底是碟片问题还是VCD机的问题?希望内行能给予解释并提出更好的解决方法。
最后谈一下刻录软件的问题,现在大家使用的不外乎Nero、Win on CD、Video Pack、Easy CD等,对于刻录VCD来说,功能最强大的莫过于Nero、Video Pack,对于初学者来说首推Nero,因为它操作起来简单易上手,前面说过其自动更名的特点很大程度上避免了VCD机不读盘的现象。但是在制作选单型VCD上,Video Pack略胜一筹,其制作VCD的功能强大,唯一美中不足就是操作较麻烦,复杂的连线对于初学者来说很头痛。两种刻录软件相比各有千秋,初学者制作普通的VCD适合用Nero,如果想制作复杂的选单型VCD,可用Video Pack来帮忙。
简述石蜡切片术的制作过程
光学显微标本的制作技术
【实验目的】
了解光学显微镜切片制作技术的基本方法步骤。
【实验原理】
采用光学显微镜研究一般生物体的内部结构,在自然状态下是无法观察清楚的,多数动、植物材料都必须经过某种处理,将组织分离成单个细胞或薄片,光线才能通过细胞。为了适应这个需要,就产生了光学显微镜制片技术。
光学显微镜的制片技术方法可分为两大类:一类是非切片法,另一类是切片法。
非切片法,是用物理或化学的方法,使细胞彼此分离,如有分离法、涂布法、压碎法等。非切片法的操作比较简单,能保侍细胞的完整,但是细胞之间的正常位置往往被更动,无法反映细胞之间的正常联系。它可以与切片法配合使用,各取其长处。
切片法,是利用锐利的刃具将组织切成极薄的片层,材料须经过一系列特殊的处理,如固定、脱水、包埋、切片、染色等,过程十分繁复。在制作过程中,还要经过一系列的物理和化学的处理,这些处理方法可根据各种不同材料的性质要求进行合理选择。切片法虽然工序繁琐,技术复杂,但是,它最能保持细胞间的正常的相互关系,能较好和较长时间地保留细胞的原貌,所以仍然是光学显微镜的主要制片方法。
【实验仪器、材料和试剂】
(一)仪器:石蜡切片机、恒温蜡箱、载玻片、盖玻片
(二)材料:洋葱根或小鼠肝
(三)试剂:乙醚、无水乙醇、甲醛、冰醋酸、苦味酸、重铬酸钾、锇酸、正丁醇、二甲苯、石蜡、甘油、鸡蛋、纱布、加拿大树胶、麝香草酚
【方法与步骤】
光学显微镜切片制作技术最简单的切片法是徒手切片,但是由于组织块往往十分柔软,
18
切削很困难,而且无法得到十分菲薄的切片,因此必须先用某些特殊物质渗入组织块的内部起支持作用,并将整个组织块包住,然后再用精密的切片机制作切片,才能获得良好的效果。这种方法称为包埋法,包埋的物质称为包埋剂。常用的包埋剂有石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等,水和塑料也可作为包埋剂。根据包埋剂的不同,分别有石蜡切片、火棉胶切片、冰冻切片等,它们各有长处,可以根据需要选用,但是使用得最多的还是石蜡切片技术。
石蜡作为包埋剂,有其独特的优点,例如:石蜡能切出极薄的蜡片(2~10μm);切片时能连成蜡带,便于制作连续切片;操作较容易,组织块可以包埋在石蜡中长期保存。然而石蜡切片的制作过程较长,步骤很多,一步不慎往往导致前功尽弃,而且这些处理引起组织块或多或少地收缩,切片时受湿度影响比较大,这些不足之处必须在制片过程中认真对待,尽量减小它的不良影响。
石蜡切片的制作过程主要包括:取材,固定,脱水,透明,透蜡,包埋,切片,贴片,染色,透明,封藏等步骤。
1.取材
材料的好坏直接影响到切片的质量,无论取哪一种动植物材料,以下几点是必须注意的。
(1)植物材料选择时须尽可能不损伤植物体或所需要的部分;动物材料取用时常对动物施以麻醉,常用的麻醉剂有氯仿和乙醚,或将动物杀死后迅速取出所需要的组织。
(2)取材必须新鲜,这一点对于从事细胞生物学研究尤为重要,应该尽可能割取生活着的组织块,并随即投入固定液。
(3)切取材料时刀要锐利,避免因挤压细胞使其受到损伤。
(4)切取的材料应该小而薄,便于固定剂迅速渗入内部。一般厚度不超过2mm,大小不超过5×5mm2。
2.固定
组织和细胞离开机体后,在一定时间内仍然延续着生命活动,会引起病理变化直至归于死亡。为了使标本能反映它生前的正常状态,必须尽早地用某些化学药品迅速地杀死组织和细胞,阻抑上述变化,并将结构成分转化为不溶性物质,防止某些结构的溶化和消失。这种处理就是固定。除了上述作用外,固定剂会使组织适当硬化以便于随后的处理,还会改变细胞内部的折射系数并使某些部分易于染色。
固定剂的作用对象主要是蛋白质,至于其他成分如脂肪和糖,在一般制作时不加考虑,如要观察这些物质,可用特殊的方法将其固定下来。
固定剂的作用表现在对材料体积的改变、硬化的程度、穿透的速度以及对染色的影响等方面。这些作用的好坏、大小,都依所固定的材料性质而定,同样一种固定液对某一材料来说是良好的,但对另外一些组织可能就不很适用。良好的固定剂必须具备的特征是:穿透组织的速度快。,能将细胞中的内含物凝固成不溶解物质,不使组织膨胀或收缩以保持原形,硬化组织的程度适中,增加细胞内含物的折光度,增加媒染和染色能力,具有保存剂作用。 固定剂有简单固定剂和混合固定剂的划分。
简单固定剂即单一的固定剂,常用的有乙醇、甲醛、冰醋酸、升汞、苦味酸、铬酸、重铬酸钾和锇酸。其中,苦味酸、升汞、铬酸既能凝固细胞清蛋白,又能凝固核蛋白;乙醇只能凝固清蛋白,而醋酸只能凝固核蛋白;甲醛、饿酸和重铬酸钾对这两种蛋白质都不凝固。
简单固定剂的局限性较大,如将其适当混合,制成复合固定剂可以取得更好的效果。常用的混合固定剂有:
Bouin液(70份苦味酸饱和水溶液+25份4%甲醛+5份冰醋酸)、Zenker液(升汞5g+重铬酸钾2.5g+硫酸钠1.0g+5ml冰醋酸+100ml蒸镏水)、Carnoy改良液(3份无水乙醇+1份冰醋酸)等。固定剂的种类甚多,我们必须依据各种固定剂的性能及制片的不同要求来加以选择。 19
固定时,须注意以下几点:
(1)固定剂应有足够的量,一般为组织块体积的10~15倍。
(2)如所固定的材料外表有不易穿透的物质,可将材料先在含乙醇的溶液中固定几分钟,再移入水溶性的固定液。
(3)材料固定后如不立即下沉,可将其中气泡抽出。
(4)固定时间依材料大小、固定剂种类而异,可从1小时到几十小时,有时中间需要更新固定剂。某些固定剂对组织的硬化作用较强,作用时间应严加控制,不能过长。
(5)一般固定剂都以新配制的为好,用过的不能再用。有些混合固定剂由甲、乙两液合并者,一定要在使用前才混合。
(6)固定完毕,根据所用固定剂的不同,用水或乙醇冲掉残留的固定剂,以免固定剂形成沉淀,影响以后组织块的染色。
3.脱水
生物组织中含有大量的水分,它和石蜡是不能相溶的,致使在包埋时石蜡无法渗入组织内部,因此须使用脱水剂将水分除尽,这就是脱水的作用。
脱水剂必须能与水以任何比例相混合。脱水剂有两类:一类是非石蜡溶剂,如乙醇、丙酮等,脱水后必须再经过透明,才能透蜡包埋;另一类是兼石蜡溶剂,如正丁醇,脱水后即可直接透蜡。
常用的脱水剂是乙醇,因为它价格便宜,易于得到。为了避免剧烈的扩散引起的组织的强烈收缩,脱水步骤应从低到高以一定的浓度梯度来进行,一般组织从30%乙醇开始,经过50%、70%、80%、95%、100%至完全脱水;对于一些柔软的组织应从15%开始。脱水时间依据组织的类型和大小而定,一般各级乙醇中放置45min到1h,如果中间须停顿,应使材料停留在70%乙醇中,因为低浓度乙醇易使组织变软、解体,高浓度乙醇有脆化组织作用,放置时间不能过长,另外,脱水必须在有盖瓶中进行,以防止高浓度乙醇吸收空气中水分导致浓度降低而使脱水不彻底。需要保存的材料可脱水至70%乙醇时停留其中,如需长期保存,可加入等量的甘油。
丙酮也是很好的脱水剂,其作用和用法与乙醇相同,不过其脱水力和收缩力都比乙醇强。
甘油常用于藻类、菌类及柔弱材料的脱水。
二氧六环为无色的石蜡溶剂,对组织没有收缩及硬化等不良后果,但其蒸气有毒,使用时须小心。
正丁醇可与水及乙醇混合,亦为石蜡溶剂,其优点是很少引起组织块的收缩与变脆。
叔丁醇的性质、作用和用法同于正丁醇,但因其价格昂贵而很少使用。
4.透明
组织块用非石蜡溶剂脱水后必须经过透明。透明剂能同时与脱水剂和石蜡混合,它取代了脱水剂后,石蜡便能顺利地渗入组织。
透明剂的种类很多,较常用的是二甲苯、甲苯、苯、氯仿、香柏油和苯胺油等。
二甲苯作用较快,透明力强,但组织块在其中停留过久,容易收缩变脆变硬,同时若脱水不净,就会引起不良后果,在应用时必须特别小心。通常将组织块先经纯乙醇与二甲苯的等体积混合液,再进入纯二甲苯,这样可减少上述的缺点。透明时间应由组织大小而定,—般各级停留时间在30min至2h,在纯二甲苯中应更换2次,总时间则以不超过3h为宜。材料经过透明,会显示出前一步脱水的效果如何,若脱水彻底,组织则显现透明状态,如组织中有白色云雾状,说明脱水不净,须返工处理,但返工的效果往往不好。使用二甲苯透明时,应避免其挥发和吸收空气中的水分,并保持其无水状态。 20
甲苯的一般性质与二甲苯相似。用法亦同,唯沸点较低,透明较慢,但不会使组织变脆。
苯的用法同于二甲苯,对组织的收缩作用小,但须警惕其爆炸和吸入而引起中毒。氯仿适于大块组织的透明。
5.透蜡和包埋
包埋用的石蜡,熔点在50~60℃之间,应根据材料本身的硬度、切片的厚薄和当时的气温条件来选用。一般动物材料最常用的石蜡熔点为52~56℃,植物材料的用54~58℃的;切片薄的用58~60℃的,切片厚的则用52~54℃的;室温10~19℃时选用52~54℃的石蜡可顺利切片,冬季可用熔点46~48℃的石蜡,夏季可选56~58℃的。
石蜡的优劣与切片的成败密切相关。鉴别石蜡质量的方法是:将石蜡熔化后倒入纸盒使其凝结且无气泡和裂痕,30~35℃放置24h且无气泡和不透明的晶状小点出现,蜡块裂面不呈颗粒状,切成薄片不碎成细粒。这种石蜡即为品质优良。含有杂质的新蜡或用过的废蜡可清洁后再用,方法是将石蜡放入锅内,加热到开始冒白烟,然后用小火继续加热30min(注意别超过发火点),使其去除水分和挥发性杂质,并在温箱中过滤以去除灰尘等颗粒。
透蜡须在恒温箱中进行,恒温箱的温度调节至高于石蜡熔点3度,使经过透明的组织块依次用石蜡与二甲苯的等量混合液、纯石蜡处理。纯石蜡应处理2~3次,透蜡的时间依材料性质而定,一般每次需15~30min。
透明的关键是控制温度的恒定,切忌忽高忽低,温度过低石蜡凝固无法渗透,温度过高使组织收缩发脆。
包埋是使浸透蜡的组织块包裹在石蜡中。具体做法是;先准备好纸盒(具体折法见图1-3及说明),将熔蜡倒入盒内,迅速用预温的镊子夹取组织块平放在纸盒底部,切面朝下,再轻轻提起纸盒,平放在冷水中,待表面石蜡凝固后立即将纸盒按入水中,使其迅速冷却凝固,30min后取出。
包埋用蜡的温度应略高于透蜡温度,保证组织块与周围石蜡完全融为一体。石蜡的迅速冷却也很重要,否则包埋块中将会产生结晶。以后切片时引起碎裂。
6.切片
(1)石蜡块的固着与整修
在包埋以后,就可进行切片。包埋好的石蜡块装上切片机进行切片前还须进行固着和整修。
固着:一般旋转式切片机上都附有可固着石蜡块的金属小盘,这也可用同样大小的台木替代。用加热的蜡铲将包埋块粘贴于固着物上,并使组织块朝外,便于以后迅速切出所需的片子。
整修:用加热的蜡铲或刀片将固着的包埋块四周修平,使上下两面修成平行面,常保留组织周围附着宽2~3mm的石蜡,而修好的蜡块呈长方形。还可削去一角以便于在蜡带上识别切片。
(2)切片机和切片刀
切片机是用来作各种组织切片的一种专门设计的精密机械,常用的是旋转式切片机,它的夹物部分是上下移动前后推进的,而夹刀部分则固定不动。主要部件是安装切片刀的刀台、安装包埋块的标本台和控制切片厚度的微动装置。切片时切片刀固定不动,转动转轮,标本台上下运动并按调好的切片厚度向前推进一定的距离,组织块上下运动一次,便在刀片上得到一张合乎厚度要求的切片。
切片刀与切片的质量直接相关。切片前必须磨刀,方法是:将切片刀装上刀柄、刀背夹、滴少许石蜡油在平滑的磨刀石上,将刀贴着磨刀石以背向刀口方向磨,使用完毕后应及时用二甲苯将石蜡油擦净。
(3)切片方法
切片前,将刀口置放大镜下观察,选择刀口平整无缺刻的部分来进行切削。将所要切的包埋块固定在标本台上,使包埋块外切面与标本夹截面平行,并让包埋块稍露出一截。将刀台推至外缘后松开刀片夹的螺旋,上好刀片,使切片刀平面与组织切面间呈15°左右的夹角,包埋块上下边与刀口平行。在微动装置上调节切片要求的厚度,调节时应注意指针不可在两个刻度之间,否则容易损伤切片机,将刀台移至近标本台处,让刀口与组织切面稍稍接触,这时就可以开始切片了。方法是:右手转动转轮,左手持毛笔在刀口稍下端接隹切好的片子,并托住切下的蜡带,待蜡带形成一定长度后,右手停止转动,持另一枝毛笔轻轻将蜡带挑起,平放于衬有黑纸的纸盒内,注意切片速度不宜太快,摇动转轮用力应均匀,防止切片机震动厉害引起切片厚薄不均匀,还应注意转动的方向,以防标本台后移而切不到片子。切片完毕,应及时用氯仿将切片机的有关部分擦净。
(4)切片中存在的问题及补救方法
石蜡切片是很不容易掌握的,有时很容易成功,有时则由于某种因素而造成切片的质量低劣,甚至完全失败。现将切片时经常遇到的一些缺点、可能的原因以及补救办法列于表1-3。
表1-3 石蜡切片可能产生的问题和解决方法
缺 点:石蜡带弯曲不直
原 因:
1.石蜡块上下两边不平行
2.石蜡块的上下两边不和刀口平行
3.刀口锋利不一,局部产生差异
4.蜡块的一边较另一边为软,或两边的硬度不一致
5.材料未居蜡块正中央
6.材料大而形不正
补 救 办 法 :
1.取下台木,将两边修干
2.调节标本台,使两者平行
3.移动刀片,改用新的刀口
4.待蜡块冷却后再切,或重新包埋
5.用刀片切去部分石蜡,使材料居中
6.在大的一边切去少许石蜡
缺 点:切片分离、不能连成带状
原 因:
1.室温过低
2.石蜡过硬
3.材料边缘留蜡太少
4.刀的角度不适合
补 救 办 法 :
1.在切片机上方开一电灯或提高室温
2.在蜡块面加一层45℃的软蜡或用手指蜡摩擦块面
3.重新包埋
4.矫正刀的角度
缺 点:切片卷起呈圆筒状
原 因:
1.室温过低
2.石蜡过硬
3.刀口太钝
4.刀的倾角太大
补 救 办 法 :
1.提高室温
2.加软蜡
3用毛笔将蜡片摊开压住,切2—3 片即成带
4.减小倾角
缺 点:切片粘附于切片刀,皱摺在一起
原 因:
1.室温过高
2.石蜡过软
3.刀口上留有一层石蜡
4.刀口钝
补 救 办 法 :
1.降低室温
2.将蜡块投入凉水中稍浸耒—增加
3.切片厚度,改用硬蜡包埋,用二甲苯拭去刀口的石蜡
4.磨刀或移动刀口
缺 点:切片纵裂
原 因:
1.刀有缺口
2.石蜡块中含有颗粒、杂质
3.刀口留有碎屑或细丝
4.组织太硬
补 救 办 法 :
1.可移动刀口
2.将颗粒拽去
3.清洁刀口
4.让包埋块在水中浸泡
缺 点:切片有横纹
原 因:
1.刀和台木的固定螺丝太松
2.刀口倾斜度太大
3.刀口有石蜡屑
补 救 办 法 :
1.旋紧螺旋
2.可放平1—2。后再切
3.用氯仿拭去
缺 点:切片厚薄不匀
原 因:
1.切片机有毛病
2.夹刀不当
3,未旋紧标本台螺旋
4。石蜡块过硬
补 救 办 法 :
1.矫正切片机装置
2.对症治疗
3.旋紧螺旋
4.将石蜡块在水中浸泡
缺 点:每张切片厚薄不匀
原 因:
1.刀口震动,是由于材料过硬
2.刀的倾角太大
补 救 办 法 :
1。在蜡块表面涂一层火棉胶
2.减小倾角
缺 点:材料发生裂隙破碎或脱落
原 因:
1.脱水不干净
2.有透明剂残留
3.石蜡透入时,温度过高或时间过长
4.由于脱水剂和透明剂的影响,使组织变硬发脆
5.材料太硬或太粗
补 救 办 法 :
1.无法弥补
2.增加浸蜡时间,重新包埋
3.无法补救
4.用正丁醇、叔丁醇和二氧六环等进行脱水和透明
5.在蜡块表面涂一薄层火棉胶溶液
缺 点:切片时发生沙沙声
原 因:
1.组织块过硬
2.包埋温度过高
3,材料内留有结晶体
补 救 办 法 :
1.浸泡水中软化
2.无法补救
3.无法补救
缺 点:石蜡块将蜡带抬起
原 因:
1.由于摩擦而产生静电荷所致
2.石蜡块上面附有石蜡碎屑
3.刀口上附有石蜡碎屑
补 救 办 法 :
1.提高室温
2.用刀片将碎屑清除
3.用二甲苯或氧仿清除
7.贴片
切好的切片必须贴附于载玻片上才能作进一步处理,但是切片常有细小的横纹,必须经展平后才能贴附,否则影响染色和观察。
贴片一般有捞片法和烫板法。
捞片法比较简单,首先将切片分割开,投入到48℃的温水浴中,这时切片都浮在水面上,由于表面张力的作用使切片自然展平,然后用涂有甘油蛋白溶液(将鸡蛋一个打破入杯中,去除蛋黄留下蛋白,用筷子充分调打成雪花状泡沫,然后用双层纱布过滤至容器中,加入等量的甘油,混合,最后加入百分之一体积的麝香草酚(thymol)作防腐用,可保存几个月到一年。)或5%明胶水溶液的载玻片倾斜着插入水面去捞取切片,使切片贴附在载玻片的合适位置,于室温下放置一昼夜后使其彻底干燥。
烫板法,是将涂有粘片剂的载玻片上涂上水,把已分割好的切片贴上去,再置载玻片于35℃恒定的烫板上让切片摊干,并倾斜或用吸水纸吸去水分,最后将载玻片再度放烫板上晾干。
要注意,不管是使用捞片法还是烫板法,所用的载玻片必须洁净,不能有油污(检验法:已涂有粘片剂的载玻片上滴加数滴蒸馏水,若发现水不均匀分散而聚成滴状,即表示载玻片不清洁,有残留油脂等物在上面);切片的光面应朝下,否则染色过程中切片容易脱落。
8.染色
组织切片是无色透明的,必须进行染色后才能观察到各种微细结构。染色方法很多,但是染色剂往往是水溶液,因此切片必须经过脱蜡而再度复水。这方法即为脱水、透明的逆过程。由于切片十分菲薄,处理的时间大大减少,一般每级停留约2~5min。
染色是一个复杂的过程,兼有物理和化学作用,对其中的机制目前了解得不很清楚。研究细胞器和细胞内的重要组分都有很多现成的方法,例如显示DNA的Feulgen反应,显示RNA的Brachet反应,显示多糖的PAS反应,显示蛋白质的Millon反应和显示某些酶的钙—钴法等,可以根据不同的要求来选用。
9.透明
染色后的切片须再次经过脱水、透明。标本经二甲苯透明后,折射率改变,透明度提高,使得染上色的部位更清晰地显示出来。
10.封藏
封藏的目的是使制成的切片能够永久保存,封藏剂必须能与透明剂互溶,对染色无影响,折射率近似玻璃和具有粘性的物质,常用的封藏剂有加拿大树胶和中性树胶。
封片的方法是:将载玻片从二甲苯中吸出后,吸去多余的二甲苯,在标本上的二甲苯尚未干透之前加一滴树胶,仔细覆盖上盖玻片,避免产生气泡,也不得拖动盖玻片,以免将标本破坏。树胶量视盖玻片大小而定,勿使过多过少。
贴上标签,注明材料、染色法,待封藏剂凝固后便成为一张成功的石蜡切片。